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高密度發(fā)酵培養(yǎng)基研制

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2020-11-23 08:58【

材料與方法


YXQ- LS- 50SⅡ型立式高壓蒸汽滅菌鍋,上海 博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;SW- CJ- 1F 型超凈 工作臺,蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;AG050 型, 厭 氧 培 養(yǎng) 罐 : 廣 州 雷 得 生 物 技 術(shù) 有 限 公 司 ; SE6001FZH,電子天平美國奧豪斯公司;MEI04E 型,分析天平梅特勒托利多公司;PHS- 3C 型,pH 計上海儀電科學儀器股份有限公司;LRH- 250 型, 生化培養(yǎng)箱上海一恒科學儀器有限公司;MX- S 型, 旋渦振蕩器美國賽洛捷克公司。改良 MRS 液體培養(yǎng)基:葡萄糖 2%、蛋白胨 1% 、 酵 母 膏 0.5% 、 牛 肉 膏 1% 、 磷 酸 氫 二 鉀 0.12%、檸檬酸銨 0.26%、硫酸鎂 0.058%、硫酸錳 0.005%、吐溫 80 0.15%、L- 半氨酸鹽酸鹽 0.1%。

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結(jié)果與分析


單因素試驗結(jié)果表明,分別按 2% (乳糖和葡 萄糖各 1%) 添加不同碳源、按 1% (蛋白胨和胰蛋 白胨各 0.5%) 添加不同氮源、按 3% (麥芽濃縮汁 和玉米漿各 1.5%) 添加不同生長因子的增菌效果不 同。其中乳糖作為碳源增菌效果最好,培養(yǎng) 12 h 活 菌數(shù)為 1.9×109 CFU/mL;胰蛋白胨為增菌效果最 好的氮源,培養(yǎng) 12 h 活菌數(shù)為 1.53×109 CFU/mL; 玉米漿為增菌效果最好的生長因子,培養(yǎng) 12 h 活 菌數(shù)為 1.84×109 CFU /mL。因此選擇乳糖、胰蛋白 胨和玉米漿為增菌培養(yǎng)基的碳源、氮源和生長因 子,20 g/mL 乳糖、10 g/mL 胰蛋白胨和 30 g/mL 麥 芽汁為響應(yīng)面試驗的因素低水平取值。由 方 差 分 析 表 可 知 , 模 型 有 統(tǒng) 計 學 意 義 (F=26.64,P<0.05),調(diào)整 R2 為 0.936 9,說明菌數(shù) 的變化 93.69%是由所選因素引起的。本模型中信噪 比值為 16.053,說明了模型的充分性和合理性。






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