布魯菌病又稱波狀熱，是布魯菌所引起的動(dòng)物源 性傳染病。在我國(guó)，羊?yàn)椴剪斁〉闹饕獋魅驹矗?民或獸醫(yī)接生羔羊?yàn)橹饕獋鞑ネ緩?，故該病在我?guó)主 要流行于東北三省、西北部及內(nèi)蒙古等牧區(qū)較為集中的地區(qū)。布魯菌病全年均可發(fā)病，但有明顯的季節(jié) 性，羊種布魯菌病春季開始發(fā)病，夏季達(dá)高峰，秋季發(fā) 病率下降；牛種布魯菌病在夏、秋季發(fā)病率較高。 布魯菌病臨床表現(xiàn)多樣，臨床上以長(zhǎng)期發(fā)熱、多汗、乏 力、關(guān)節(jié)疼痛、肝脾及淋巴結(jié)腫大為特點(diǎn)，多為慢性感 染且并發(fā)癥較多。布魯菌病患者多數(shù)是以其他疾病 來就診，臨床上容易漏診或誤診。由于布魯菌自身生 長(zhǎng)緩慢，鑒定耗時(shí)較長(zhǎng)，環(huán)境要求高等特點(diǎn)，導(dǎo)致鑒定 正確率低，容易錯(cuò)報(bào)或漏報(bào)。

１ 臨床資料

患者，男，７５歲，于２０１８年３月牙周膿腫后出現(xiàn) 發(fā)熱，伴畏寒，寒戰(zhàn)，最高體溫３８ ℃，無咳嗽、咳痰，無 惡心、嘔吐。因反復(fù)發(fā)熱１０ｄ，尿痛３ｄ，尿潴留１ｄ入 院。入院查體：神志清晰，精神欠佳，全身皮膚黏膜無 黃染，全身淺表淋巴結(jié)未觸及腫大，頭顱無畸形。實(shí) 驗(yàn)室檢查：白細(xì)胞計(jì)數(shù)為８．１×１０９／Ｌ；中性粒細(xì)胞百 分比為６７．３％；紅細(xì)胞總數(shù)、血紅蛋白、血小板等無明 顯異常，紅細(xì)胞沉降率（ＥＳＲ）為９ｍｍ／ｈ。

２ 細(xì)菌培養(yǎng)、形態(tài)觀察及鑒定

血培養(yǎng)第４天需氧瓶報(bào)陽(yáng)，抽血培養(yǎng)物涂片進(jìn)行 革蘭染色，鏡下見革蘭陰性小桿菌及短小桿菌，呈細(xì) 沙樣堆積，轉(zhuǎn)種血平板，麥康凱平板及嗜血巧克力瓊 脂平板，于５％的 ＣＯ２、３５ ℃條件下培養(yǎng)，次日形成細(xì) 小針尖樣菌落。繼續(xù)培養(yǎng)１ｄ，革蘭染色后鏡檢見細(xì) 小桿菌，氧化酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，觸酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。用生理鹽 水把上 述 菌 落 濃 度 調(diào) 成 至 ０．５０～０．６３ 麥 氏 濃 度 （ＭＣＦ），用全自動(dòng) ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ上機(jī)鑒定，６ｈ 后 自 動(dòng) 鑒 定 結(jié) 果 為 吉 拉 爾 玫 瑰 單 胞 菌，可 信 度 為 ９６％，生物編碼１０００００１３００７０１００１。由于對(duì)吉拉爾玫 瑰單胞菌了解不足，查閱文獻(xiàn)后，經(jīng)小組討論并結(jié)合患者臨床資料和菌落形態(tài)懷疑布魯菌。 通過柯茲羅夫斯基染色（柯氏染色）法，菌落呈紅 色球桿狀，大腸埃希菌 ＡＴＣＣ２５９２２作為對(duì)照菌呈綠 色。第２次鑒定，將菌落濃度調(diào)成１．０ ＭＣＦ，８．２５ｈ 后 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ鑒定為馬耳他布魯菌，可信度為 ９８％。生物編碼 １０００００１３００２０１００１。吉拉爾玫瑰單 胞菌和馬耳他布魯菌兩者生化反應(yīng)僅琥珀酸鹽產(chǎn)堿 （ＳＵＣＴ）、ＥＬＬＭＡＮ 反應(yīng)有區(qū)別，吉拉爾玫瑰單胞菌 均為陽(yáng)性，馬耳他布魯菌均為陰性。

３ 血清學(xué)試驗(yàn)

患 者 血 清 進(jìn) 行 抗 體 檢 測(cè)，布 病 虎 紅 平 板 陽(yáng) 性， 凝集。

４ 討 論 　　

對(duì)此，上海博迅認(rèn)為布魯菌通過吸入，皮膚擦傷，攝取或通過黏膜入侵 宿主細(xì)胞，布魯菌最重要的特征是具有在吞噬細(xì)胞和非 吞噬細(xì)胞內(nèi)的生存和繁殖的能力。布魯菌不產(chǎn)生經(jīng) 典的毒力因子，主要毒力因子為脂多糖（ＬＰＳ），Ｔ４ＳＳ 分泌系統(tǒng)和 ＢｖｒＲ／ＢｖｒＳ系統(tǒng)。布魯菌病的治療主 要采用雙藥聯(lián)合治療，最常見抗菌藥物的組合為氟喹 諾酮與利福平。目前，有研究使用其他方法破壞布魯 菌 細(xì) 胞 內(nèi) 復(fù) 制，例如?；切苋パ跄懰峄蛉藚⒃碥眨痢?本病例中血培養(yǎng)第４天報(bào)陽(yáng)，培養(yǎng)出細(xì)小桿菌， 首次調(diào)菌落濃度為０．５０～０．６３ ＭＣＦ，因此鑒定為吉 拉爾玫瑰單胞菌。對(duì)患者進(jìn)行調(diào)查可知，患者從事羊 養(yǎng)殖業(yè)。經(jīng)過查資料和小組討論，布魯菌為革蘭陰性 球桿菌或短桿菌，單個(gè)或成對(duì)、短鏈狀排列，無鞭毛及 芽孢；玫瑰單胞菌通常為革蘭陰性、呈鏈狀排列小 球桿菌。兩者形態(tài)學(xué)特點(diǎn) 相 似，且 生 化 反 應(yīng) 差 別 較 小，難以鑒別。分析原因，布魯菌菌落濃度配制不正 確，會(huì)導(dǎo)致 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ鑒定系統(tǒng)鑒定錯(cuò)誤，布 魯菌菌落濃度應(yīng)為１．０ＭＣＦ。重新調(diào)１．０ＭＣＦ上機(jī) 鑒定，第２天鑒定為馬耳他布魯菌。同時(shí)進(jìn)行柯氏染 色，染色后細(xì)菌呈紅色球 桿 狀。補(bǔ) 充 了 部 分 生 化 反 應(yīng)，脲酶試驗(yàn)陽(yáng)性。抽取患者血清進(jìn)行抗體檢測(cè)，最 終確定為馬耳他布魯菌。通過這次儀器錯(cuò)誤的鑒定,意識(shí)到對(duì)布魯菌屬的鑒定應(yīng)結(jié)合形態(tài)染色特征、補(bǔ)充 試驗(yàn)，了解患者近期接觸史、旅行經(jīng)歷等臨床資料進(jìn) 行鑒別。細(xì)菌學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)是布魯氏病的主 要診斷方法，其中細(xì) 菌 學(xué) 檢 測(cè) 是 診 斷 布 魯 菌 病 的 “金標(biāo)準(zhǔn)”，但耗時(shí)較長(zhǎng)，環(huán)境要求高，檢出陽(yáng)性率低， 靈敏度不高。