新鮮冰凍血漿( Fresh frozen plasma,F(xiàn)FP) 是血液 在采集后 6 ~ 8 h 內(nèi)分離,- 50℃ 迅速冷凍,- 30℃ 中 保存 1 年,包含幾乎全部凝血因子( 不穩(wěn)定因子 FⅤ和 FⅧ) ,新鮮冰凍血漿主要包含免疫球蛋白、凝血因子及血漿蛋白,主要治療和預(yù)防出血性疾病、凝血性疾病 及大量輸血導(dǎo)致的凝血功能障礙。目前我國醫(yī)院 尚未全面實行冷鏈箱,無法對血漿應(yīng)用全程監(jiān)控,血漿 的不穩(wěn)定性及融化后不及時輸注嚴(yán)重影響臨床治療效果。研究表明多袋血輸注時間多為 190 ~ 330 min,無 法證明所輸血液是否符合存放要求,超出時限的血液是 否應(yīng)當(dāng)報廢,是目前無法解決的事情。本研究收集 100 份輸血科發(fā)出的血漿,分析不同時間點的血漿凝血 因子及凝血功能,旨在探索不同時間對新鮮冰凍血漿的 質(zhì)量參數(shù)影響。
1 資料與方法
1. 1 一般資料
收集 2016 年 12 月 ~ 2017 年 6 月 100 份輸血科發(fā) 出的血漿,所有血漿均來源于中心血站采集的無償獻(xiàn)血 者,并完全合格血漿。無償獻(xiàn)血者年齡選取 18 ~ 22 歲, 采取 3 300 g,15 min 低溫離心,所有血漿均采用虹吸 法制備,每份要求血站留取 15 ~ 20 mL。 - 20℃保存。
1. 2 方法
37℃血漿融化儀中融化 100 份新鮮冰凍血漿,融 化后的冰凍血漿于超凈臺中,遵循無菌操作對其進(jìn)行 分袋處理,共 6 袋,分別室溫下放置 0 h、0. 5 h、2 h、 4 h、8 h、12 h,分別對應(yīng)對照組、實驗組 A、實驗組 B、 實驗組 C、實驗組 D、實驗組 E。因不同人血液成分基 礎(chǔ)值有較大波動,故以同一血漿標(biāo)本在室溫下放置 0 h為對照組,排除個體差異的干擾。實驗中主要儀器及 試劑血漿融化儀( NAI - XYJ,上海那艾精密儀器有限 公司) ,上海博迅BSC-1000A2生物安全柜 ,全自動血凝儀( CS - 2000,日本 SYSMEX 公司) , PC,ATⅢ,F(xiàn)Ⅴ和 FⅧ凝血因子試劑盒等均由 sigma 公 司生產(chǎn)。凝血因子 FⅧ∶ C、凝血因子 FⅤ∶ C、抗凝血 酶( AT) 和蛋白 C( PC) 均采用 sigma 公司生產(chǎn)試劑 盒檢測,凝血酶原時間( PT) 、活化部分凝血活酶時間 ( APTT) 、纖維蛋白原( FIB) 均采用全自動凝血分析 儀進(jìn)行檢測。
1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法
采用統(tǒng)計軟件 SPSS 16. 0 對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析, 計量資料以 x ± s 表示,采用 t 檢驗。計數(shù)資料以% 表 示,采用 χ2 檢驗。以 P < 0. 05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2. 1 對照組與實驗組凝血因子變化情況( 見表 1)
2. 2 對照組與實驗組凝血功能變化
0. 5 h、2 h、4 h、8 h、12 h 后的 PT、APTT、Fbg 及 INR 與 0 h 比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義( P >0. 05) 。見表 2。
3 討論
新鮮冰凍血漿是目前醫(yī)院常見的血液成分,主要 治療和預(yù)防出血性、凝血性疾病或大量輸血導(dǎo)致的凝 血功能障礙,同時也有利于提高患者的血漿蛋白水平 ?!杜R床輸血技術(shù)規(guī)范》指出 37℃ 水浴后的新鮮冰凍血漿應(yīng)當(dāng)最多在室溫放置 2h 輸注,即使不能 2h 之內(nèi)輸注應(yīng)當(dāng)?shù)蜏? 2 ~ 6℃ ) 保存 24h 之內(nèi)。但冷鏈 箱無法在臨床普及,因此臨床科室執(zhí)行具有一定的困 難。目前,室溫放置時間對新鮮血漿質(zhì)量的影響尚無 權(quán)威研究。凝血酶原時間( PT) 是外源性凝血系統(tǒng) 篩選試驗,主要反映凝血因子Ⅱ、Ⅴ,Ⅶ、Ⅹ和纖維蛋白 原的功能與水平,活化部分凝血活酶時間( APTT) 是 內(nèi)源性凝血系統(tǒng)篩選試驗,主要反映凝血因子Ⅷ、Ⅸ、 Ⅺ功能與水平,纖維蛋白原( FIB) 是凝血過程中主要 蛋白質(zhì),以上指標(biāo)均能夠反映血漿凝血功能。凝血因 子Ⅴ為不穩(wěn)定因子,容易降解,凝血因子Ⅶ和Ⅷ在不同 時段制備差別較大,半衰期為 8 ~ 12 h,隨著融化后時 間的延長將不斷下降,直至完全失去活性。