全球氣候變暖以及厄爾尼諾現(xiàn)象等的出現(xiàn)對(duì)動(dòng) 物的影響越 來(lái) 越 大。隨著 畜 牧 養(yǎng) 殖 集 約 化 程 度 的提高,由夏季高溫誘發(fā)的熱應(yīng)激反應(yīng)在畜禽飼養(yǎng) 中已越來(lái)越普遍,可能導(dǎo)致肝、脾、肺、腎、中 樞 神 經(jīng)系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)等多個(gè)功能紊亂和多臟器功能障礙。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
健康的4周齡60只昆明小鼠,購(gòu) 自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,常規(guī)飼養(yǎng)1周。
1.1.2 藥品及主要試劑
淫羊藿、巴戟天、陽(yáng)起石、 當(dāng)歸、黨參、白術(shù)、香薷、甘草,購(gòu)自保定市同仁堂,粉 碎過(guò)40目篩,Bouins液。
1.1.3 主要儀器
生 化 培 養(yǎng) 箱,博迅SPX-250B-Z型,上 海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品;滑走切片機(jī), AO-S60型,AmericanOptical公司產(chǎn)品;電子天平, 北京賽多利斯有限公司產(chǎn)品。
1.2 方法
1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與處理
將60只小鼠隨機(jī)分 為3組,第 1 組 為 室 溫 對(duì) 照 組,在 室 溫(25℃)中飼 養(yǎng),喂基礎(chǔ)日糧;第2組為熱應(yīng)激對(duì)照組,在33℃培 養(yǎng)箱中飼養(yǎng),喂基礎(chǔ)日糧;第3組為中藥組,在33℃ 培養(yǎng)箱中飼養(yǎng),飼 喂 含 有10g/kg消暑促情散的基 礎(chǔ)日糧,3組均保證飲水充足。飼養(yǎng)30d后分批處 死小鼠,取肝、脾、肺、腎等用波恩液固定,備用。
1.2.2 小鼠生長(zhǎng)指標(biāo)
于試驗(yàn)前后稱量各組小鼠體 重,統(tǒng)計(jì)每組小鼠的 采 食 量,計(jì) 算 增 重 率、生 長(zhǎng) 率 以 及飼料轉(zhuǎn)化 率。增 重 率(%,WGR)=(最終 體 重- 最初體重)/最初 體 重×100%;特定 生 長(zhǎng) 率(%)= [Ln(最 終 體 重)-Ln(最 初 體 重)]/試 驗(yàn) 天 數(shù) × 100%;料肉比(FCR)=飼料總耗量/總增重。
1.2.3 小鼠臟器指數(shù)
試驗(yàn)結(jié)束時(shí),禁食24h (自 由飲水)后稱重,小鼠全部摘眼球取血收集血液后,脫頸處死,采取肝臟、脾臟、肺臟和腎臟,稱重并計(jì)算 內(nèi)臟器官指數(shù)(表2)。臟器指數(shù)(mg/g)=臟器重量 (mg)/體重(g)。
1.2.4 內(nèi)臟 器 官 切 片 的 制 備
處 死 小 鼠 后,取 肝、 脾、肺、腎,用波恩氏液固定,石蠟切片,HE染色。
1.2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差 表 示。 用 SPSS20.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析 (One-wayANOVA)。P<0.05表示差異顯著,P< 0.01表示差異極顯著。
2 結(jié)果
2.1 小鼠的生長(zhǎng)指標(biāo)
與室溫對(duì)照組相比,熱應(yīng)激對(duì)照組增重率極顯著 降低(P<0.01),中藥組增重率顯著降低(P<0.05), 其中中藥組增重率顯著高于熱應(yīng)激對(duì)照組;室溫對(duì)照 組的生長(zhǎng)率顯著高于熱應(yīng)激組(P<0.05),但與中藥 組差異不顯著(P>0.05);熱應(yīng)激對(duì)照組的飼料轉(zhuǎn)化 率均高于室溫對(duì)照組和中藥組(表1)。
2.2 小鼠內(nèi)臟指數(shù)
與室溫對(duì)照組 相 比,熱應(yīng)激對(duì)照組的小鼠內(nèi)臟 指數(shù)均有所降低,其中脾臟以及肺臟指數(shù)極顯著降 低(P<0.01),肝 臟 以 及 腎 臟 指 數(shù) 顯 著 降 低 (P < 0.05)。與熱應(yīng)激對(duì)照組相比,中藥組臟器指數(shù)均有 所升高(表2)。
2.3 肝、脾、肺、腎病理組織學(xué)變化
室溫對(duì)照組小鼠肝 臟切片的肝細(xì)胞整齊排列在中央靜脈周圍,而熱應(yīng)激對(duì)照組小鼠肝細(xì)胞出現(xiàn)輕微的空泡化,竇狀隙狹 窄,排列不整齊,有些肝細(xì)胞出現(xiàn)肝細(xì)胞胞核濃染以 及裂解消失的現(xiàn)象。中藥組肝臟有明顯改善,肝索排列較整齊,核仁明顯。
3 討論
夏季熱應(yīng)激屬于暑邪,暑性升散,傷津 耗 氣,損 及腎陰腎陽(yáng),導(dǎo)致小鼠生殖機(jī)能下降,且暑多夾濕, 濕邪困脾,以致食欲下降,不能化生水谷精微,從而 導(dǎo)致生產(chǎn)生長(zhǎng)性能下降。消暑促情散主要是由淫羊 藿、巴戟天、陽(yáng)起石、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、香薷、甘草組 成,以淫羊藿、巴戟天以及陽(yáng)起石為主藥,具有補(bǔ)腎 壯陽(yáng),強(qiáng)筋壯骨以及祛風(fēng)濕之功效;黨參、白術(shù)為臣 藥,健脾補(bǔ)氣,化生水谷精微,以后天補(bǔ)先天,促進(jìn)腎精的化生;當(dāng)歸具有養(yǎng)血和血、補(bǔ)血調(diào)經(jīng)的功效,香 薷具有祛暑 化 濕 的 作 用,兩 者 為 佐 藥,甘 草 補(bǔ) 脾 益 氣,調(diào)和諸藥為使藥。因此,從中醫(yī)角度分析,消暑 促情散可以補(bǔ)足因暑邪所致腎、肝等五臟精氣的損 耗,調(diào)節(jié)十二經(jīng)氣血,從而有效改善雌性小鼠夏季乏 情以及內(nèi)臟器官的損傷。
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