1 材料
Milli-Q 超 純 水 制 備 儀(德 國(guó) Millpore 公 司); 十萬(wàn)分之一天平(瑞士 Mettler Toledo 公司);CO2 恒 溫細(xì)胞培養(yǎng)箱、MuATiskan MK3 酶標(biāo)儀、細(xì)胞流式儀 (美國(guó) Thermo 科技有限公司);ChemiDoc MP 多功能 化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)(美國(guó)伯樂公司);HH-S 數(shù)顯恒溫 水浴鍋(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)。
2 方法
取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的 HCT116 細(xì)胞 1×103 個(gè) / 孔接種 于 6 孔板中,培養(yǎng) 5 d 后,分別加入 0(空白)、30、 60 μmol·L- 1 的番茄堿進(jìn)行實(shí)驗(yàn),培養(yǎng) 72 h 后,棄 培養(yǎng)基,PBS 清洗 3 次,加入 4× 組織固定液固定 15 min,結(jié)晶紫(2% 乙醇或 PBS 溶解)染色 5 min, 清水緩慢清洗,靜置晾干,顯微鏡下觀察,并進(jìn)行拍 照和統(tǒng)計(jì)。
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