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IgG血型抗體效價預(yù)測分析?。?!

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-10-08 11:24【

新生兒 ABO 溶血?。ǎ粒拢希龋模危┦悄阁w受到胎 兒紅細胞抗原刺激而產(chǎn)生IgG 類血型抗體,該抗體可 以通過胎盤屏障進入胎兒的體內(nèi),致敏胎兒的紅細 胞,并被胎兒的單核巨噬系統(tǒng)處理,從而引起胎兒或 新生兒紅細胞被破壞而導(dǎo)致免疫性溶血。在我國, 母嬰 ABO 血型系統(tǒng)不合占比較高。因此,孕婦產(chǎn)前 檢查IgG 血型抗體效價,并分析其與新生兒溶血病 (HDN)的發(fā)病率關(guān)系,是早期預(yù)防及后期輔助診斷 ABO-HDN 的有效方法。本研究通過對入組的56 例 O 型 Rh(D)陽性孕婦進行產(chǎn)前IgG 血型抗體效價 檢測,對其分娩后的新生兒進行 ABO-HDN3項的檢 測,探討孕婦產(chǎn)前IgG 血型抗體效價與 ABO-HDN 發(fā) 生率之間的關(guān)系,現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取本院婦產(chǎn)科門診產(chǎn)檢的56 例 O 型 Rh(D)陽性孕婦,年齡22~36歲,中位年齡 32歲;孕期21~25周,中位孕期23周。納入標(biāo)準(zhǔn):本 院產(chǎn)科門診產(chǎn)檢,身體健康,孕 期 未 見 異 常 的 孕 婦。 排除標(biāo)準(zhǔn):產(chǎn)前不規(guī)則抗體陽性、患有自身免疫性溶 血性疾病或其他原因?qū)е碌母鞣N溶血性疾病、有輸血 史等。孕婦均進行第一次產(chǎn)前 ABO 血型抗體效價檢 測,記錄相關(guān)參數(shù),包括孕婦 ABO 血型、IgG 血型抗 體效價、不規(guī)則抗體、血常規(guī)等。

1.2 試劑

ABO 反定型用紅細胞及抗 A、抗 B、抗 D 標(biāo)準(zhǔn)血清、不規(guī)則抗體檢測試劑、2-巰基乙醇(2-Me) 均為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn);ABO 血 型卡、抗人球蛋白微柱凝膠檢測卡均為長春博訊生物 技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.3 方法

1.3.1 抗體效價檢測

采集孕婦產(chǎn)前靜脈血液標(biāo) 本,進行血常規(guī)、ABO 血型、不規(guī)則抗體及IgG 血型 抗體效價檢測。血常規(guī)檢測采用 Sysmex-XN9000全 自動血細胞分析儀檢測;ABO 血型鑒定采用2次復(fù) 核方式,第1次用微柱凝膠卡法作正反定型確定孕婦 血型,第2次使用抗 A、抗 B、抗 D 標(biāo)準(zhǔn)血清及 ABO 反定型用紅細胞,采用試管法作正反定型復(fù)核孕婦血 型。不規(guī)則抗體試驗:采用博迅抗人球蛋白微柱凝膠 卡按試劑盒說明書操作。孕婦產(chǎn)前IgG 血型抗體效 價試驗:采用抗人球蛋白微柱凝膠卡法按照2-Me試 劑說明書操作,具體分3個步驟進行試驗,第1步將 孕婦血清與2-Me按照1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、 1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024的比例在標(biāo) 記好的試管內(nèi)稀釋;第2步將稀釋液放置37 ℃恒溫水 浴箱15min進行IgM 抗體裂解操作(裂解后溶液需 用 ABO 反定型用紅細胞溶液驗證裂解是否完全,若未完全裂解需用0.9%氯化鈉溶液稀釋下一個比例重 新裂解,裂解后重復(fù)第2個步驟);第3步用裂解后溶 液與0.8%的 A 型或B型反定型用紅細胞溶液按照1 ∶1比例加入抗人球蛋白微柱凝膠卡中進行孕婦產(chǎn)前 抗體效價檢測。

1.3.2 ABO-HDN3項檢測

用微柱凝膠卡法對新 生兒血型及 ABO-HDN3項檢測,其中包括間接抗人 球蛋白試驗(IAT)、直接抗人球蛋白試驗(DAT)、抗 體釋放試驗。IAT 及 DAT 兩項試驗按照抗人球蛋 白卡試劑說明書進行操作;抗體釋放試驗分 3 個步 驟:第1步用生理鹽水洗滌壓積紅細胞3~5次(洗滌 末次吸出上清液,作抗體釋放試驗的陰性對照,以驗 證洗滌是否充分);第2步加入等體積的生理鹽水充 分混勻后置56 ℃水浴箱10min;第3步離心后取出 上清液(即放散液)加入抗人球卡并加入洗滌末次的 上清液作為陰性對照,進行抗體檢測。

1.4 結(jié)果判斷

ABO-HDN 的診斷包括以下幾點: 母嬰血型不同、DAT、IAT 和抗體釋放試驗的結(jié)果。 以抗體釋放試驗陽性為診斷標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合新生兒血紅蛋 白、膽 紅 素 水 平 等 臨 床 數(shù) 據(jù) 及 其 臨 床 癥 狀 來 診 斷 ABO-HDN。見表1。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用 SPSS20.0軟件對數(shù)據(jù)進行 分析。計數(shù)資料采用百分數(shù)表示,組間比較采用χ 2 檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

結(jié)果顯示,56例 O 型 Rh(D)陽性孕婦產(chǎn)前抗體效價以低效價為主, 90.7%的孕婦抗體效價在1∶256以下,其中,50.0% 的孕婦抗體效價≤1∶64,抗體效價<1∶64的患者占 25.9%,抗體效價為1∶64的患者占24.1%??贵w效 價為1∶128的患者占18.5%,抗體效價為1∶256的 患者 占 22.2%,抗 體 效 價 ≥1∶512 僅 占 總 數(shù) 的 9.3%。以孕婦產(chǎn)前IgG 血型抗體效價1∶64作為界值, 將入組的孕婦按照參考值分為兩組。結(jié)果顯示,產(chǎn)前 IgG 血型抗體效價≥1∶64組 ABO-HDN 陽性檢出 率高于產(chǎn)前效價<1∶64組(P=0.02)。產(chǎn)前抗體效 價<1∶64、1∶64、1∶128、1∶256、≥1∶512 的 ABO-HDN 檢 出 率 分 別 為56.3%、69.2%、90.0%、 91.7%、100.0%。對56例新 生兒按 ABO 血型進行分組,A 型新生兒 ABO-HDN 陽性率為72.7%,B型 ABO-HDN 陽性率為79.4%, B型新生兒 ABO-HDN 陽性率高于 A 型,但差異無統(tǒng) 計學(xué)意義(P=0.56)。進一步研究分析發(fā)現(xiàn),在IgG 血型抗體 <1∶64 和 1∶64 的孕婦中,B 型 新 生 兒 ABO-HDN 檢出率高于 A 型,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05);在IgG 血型抗體1∶128和1∶256孕婦 中,A 型新生兒 ABO-HDN 檢出率則高于 B 型,差異 有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。IgG 血型抗體≥1∶512的 孕婦中,A 型新生兒與B型新生兒 ABO-HDN 檢出率 差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

3 討 論   

上海博迅通過動態(tài)監(jiān)測孕婦產(chǎn)前IgG 血型抗體效價水平對預(yù) 防 ABO-HDN 發(fā)生有著重要意義。胎兒紅細胞抗 原免疫母體產(chǎn)生的IgG 血型抗體能通過胎盤屏障與 胎兒的紅細胞血型抗原相結(jié)合,分娩后,容易引起新生兒發(fā)生肝脾腫大、膽紅素腦病甚至死亡等溶血病特 征,嚴(yán)重威脅新生兒的健康乃至生命安全。因此, 對孕婦進行產(chǎn)前IgG 血型抗體效價檢測,可以判斷孕 婦血中是否存在IgG 類血型抗體,從而有效地預(yù)防 ABO-HDN。 本次研究通過對入組的56例 O 型 Rh(D)陽性的 孕婦進行產(chǎn)前IgG 血型抗體效價檢測,并對孕婦分娩 后的新生兒進行 DAT、IAT 及抗體釋放試驗的檢測, 通過收集孕婦產(chǎn)前血型抗體效價結(jié)果及 ABO-HDN3 項試驗結(jié)果來判斷 ABO-HDN 的發(fā)生情況,研究結(jié)果 顯示,50.0%的孕婦產(chǎn)前抗體效價≤1∶64,這提示在 日常檢測中應(yīng)該注意預(yù)防漏檢低效價的樣本。由此 可見,設(shè)定孕婦產(chǎn)前抗體參考值,對預(yù)測 ABO-HDN 的價值意義重大。