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銀耳多糖深層培養(yǎng)方法

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-04-30 18:09【
上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司對銀耳的深層培養(yǎng)搖瓶生產(chǎn)方法進(jìn)行了研究 , 簡單方法介紹如下 :
 
1、儀器設(shè)備:不銹鋼小鏟50支,玻璃吸管( 10ml ) 5支,三角燒瓶 ( 500ml) 500只,上海博迅超凈工作 臺(單人 ) 1臺,上海博迅雙層大容量搖瓶機(jī)(旋轉(zhuǎn)式220轉(zhuǎn)/分鐘) 5臺,芽抱含量用血球計數(shù)板計數(shù);測pH用25型酸度計;測總塘和還原糖用裴林氏法,測氨基氮用甲醛法;測銀耳搪 (抱外)含量用酚一硫酸法。

2、工藝流程試管種,種子瓶、發(fā)酵瓶、提取銀耳成品,具體時間、溫度、接種方法將在以下介紹:
培養(yǎng)基配方:斜面培養(yǎng)基 ( 腸 ) :馬鈴薯,蔗搪名;
種子:搖瓶培養(yǎng)基 ( 腸 ) ,馬鈴薯25、30( 可用淀粉、玉米漿代替 ) ,蔗糖;
發(fā)酵搖瓶培養(yǎng)基 ( 腸 ) : 玉米粉,蔗糖,蛋白等。
培養(yǎng)基配制:種子搖瓶,馬鈴薯洗凈、去皮、切成小塊,煮30分鐘,用兩層紗布過濾,取濾液加入其他成份,溶解后加水至要求體積,分裝人500ml三角瓶 , 按常規(guī)包扎、消毒、待接種。
發(fā)酵搖瓶按配方準(zhǔn)確稱量培養(yǎng)基各成份 , 加水溶解至要求體積,分裝500ml三角瓶,按常規(guī)包扎、消毒,待接種。
培養(yǎng)條件-種子瓶:用切塊法取斜面菌種接入種子搖瓶,置上海博迅旋轉(zhuǎn)式搖床 (220rpm ) 上 , 在28℃下培養(yǎng)48小時。
發(fā)酵搖瓶:用吸管將種子瓶中的培養(yǎng)液按5腸接種量接入發(fā)酵瓶, 置上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司生產(chǎn)的旋轉(zhuǎn)式搖床(220rpm )上 , 在30℃下培養(yǎng)72小時。
放瓶標(biāo)準(zhǔn) 一般種子搖瓶、 發(fā)酵瓶是以培養(yǎng)時間為培養(yǎng)周期,但一 定要達(dá)到下列標(biāo)準(zhǔn):

 
種子瓶放瓶標(biāo)準(zhǔn):芽抱含量每毫升達(dá)15億個以上,粘稠度明顯增加 , 比消毒后增加2、3倍 (用自制的粘度計為準(zhǔn)) ;PH6.5、7.5總糖。7-1.10腸;還原搪0.05;氨基氮,銀耳糖3000r/ml以上。
發(fā)酵瓶放瓶標(biāo)準(zhǔn): 芽抱含量每毫升10、15億個左右;pH6.5~7.5;總;還原塘。氨基氮;銀耳搪6000r/ml以上。
銀耳多糖提取將發(fā)酵好的發(fā)酵液倒入容器中,煮沸3~ 4分鐘,迅速冷卻,量好體積,加適量氯化鈣,溶解后再用藥用酒精提取,靜置2~ 5小時,去掉上清液( 送去回收酒精,一般回收率達(dá)95腸以上 ) ,下層重液離心分離,濾講再用C.P級酒精洗滌、離心 濾餅為濕銀耳多糖,烘干過60目篩即為銀耳多糖粉,可供藥用或做食品添加劑,銀耳多糖成品為白色或淺黃、淺灰色。水溶液為膠體溶液pH7.08。
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