靈芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）是一種營養(yǎng)和藥用價值極高且無毒副作用的藥食同源真菌，具有扶正固 本、滋補強身的功效．靈芝的主要有效成分有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、生物堿、靈芝多糖、三萜類、多酚類、有機(jī) 鍺、維生素等．靈芝具有保護(hù)肝臟、抗氧化、防衰老、提高機(jī)體免疫力、降血糖血脂、抗腫瘤等功效．

１ 材料與方法

１．１ 材料與試劑

靈芝菌種，北京吉園科技有限公司；牛蒡、土豆、茉 莉 花 茶 等 原 材 料，市 售；海 藻 酸 鈉、β－環(huán)狀 糊 精、香 草 醛、苯酚等，分析純試劑．

１．２ 儀器與設(shè)備

ＳＷ－ＣＪ－２ＦＤ超凈工作臺，上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)配廠；ＨＨ．Ｂ１１．６００－Ｓ－Ⅱ恒溫培養(yǎng)箱，上海躍進(jìn)醫(yī)療機(jī)械廠；ＨＺ１５０Ｌ恒溫培養(yǎng)搖床，ＩＸＱ－ＳＧ４６－２８０Ａ 立式壓力蒸汽滅菌機(jī)，上海申安醫(yī)療機(jī)械廠．

１．３ 方法

１．３．１ 靈芝菌種活化、培養(yǎng)

馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基的配制：按國標(biāo) ＧＢ４７８９．１５—２０１０配制，用于菌種的復(fù)蘇與保存 ． 制備液體培養(yǎng)基：?。担埃缧迈r去皮牛蒡根，用組織搗碎機(jī)破碎，加入５ｇ酵母浸膏混勻，加水至５００ｍＬ， 于電爐上煮沸并且保持微騰６ｍｉｎ． 靈芝液體培養(yǎng)：靈芝菌株接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行活化，取活化后靈芝菌塊接種于牛 蒡液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，用苯酚－硫酸法測胞外多糖含量．

１．３．２ 茉莉花茶汁的制備

將茉莉花茶放入一定 量 的 燒 杯 中，按 １∶５０ 的比例加入茉莉花茶和蒸餾水，于 ９０ ℃ 水浴 鍋 中 浸 泡 １０ｍｉｎ，冷卻、過濾得到綠茶汁．

１．３．３ 靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)單因素試驗

分別改變培養(yǎng)溫度、時間和轉(zhuǎn)速，測定胞外多糖含量．培養(yǎng)溫度分別為２１，２４，２７，３０，３３ ℃；培養(yǎng)時間分 別為５，６，７，８，９ｄ；轉(zhuǎn)速分別為９０，１００，１１０，１２０，１３０ｒ／ｍｉｎ．

１．３．４ 保健飲料產(chǎn)品工藝流程

工藝流程：靈芝菌種活化培養(yǎng)→靈芝液體培養(yǎng)→發(fā)酵液過濾→離心→取上清液作為調(diào)配液→添加茉 莉花茶汁、檸檬酸、穩(wěn)定劑等調(diào)配→均質(zhì)→灌裝→封口→滅菌→冷卻→產(chǎn)品．

１．３．５ 保健茶飲料產(chǎn)品穩(wěn)定性實驗

選擇羥甲基纖維素納、黃原膠、β－環(huán)狀糊精等穩(wěn)定劑進(jìn)行正交試驗．因素水平見表１



１．３．６ 飲料產(chǎn)品調(diào)配優(yōu)化試驗

將發(fā)酵液離心分離后的上清液作為調(diào)配液，按比例加入檸檬酸、茉莉花茶汁、白砂糖等進(jìn)行調(diào)配．因素水 平見表２．

１．３．７ 保健飲料產(chǎn)品質(zhì)量檢測

１）感官評價 選擇１０名專業(yè)人員對保健茶飲料進(jìn)行感官評分 ．評分標(biāo)準(zhǔn)見表３．
２）茶飲料產(chǎn)品理化指標(biāo)測定方法 靈芝三萜化合物，采用可見分光光度法測定；靈芝多糖，用苯酚－硫酸 法測定；可溶性固形物，用折光法測定；砷，用 ＧＢ／Ｔ５００９．１１—２００３銀鹽法測定；鉛，用 ＧＢ／Ｔ５００９．１２—２０１０ 石墨爐原子吸收光譜法測定．
３）茶飲料產(chǎn)品微生物指標(biāo)測定方法 菌落總數(shù)，用 ＧＢ／Ｔ４７８９．２—２００３方法檢測；大腸菌群，用 ＧＢ／Ｔ ４７８９．３—２００３方法檢測．

２ 結(jié)果與分析

分析得到的最優(yōu)方案是 Ａ１Ｂ１Ｃ２，即羥甲基纖維素鈉為 ０．０９％，黃原膠為０．０５％，β－環(huán)狀糊 精為０．２０％．從結(jié)果中比較得出，黃原膠是最能影響飲料的穩(wěn)定性的，其次是β－環(huán)狀糊精，對飲料的穩(wěn)定性 影響最小的是羥甲基纖維素鈉．如此重復(fù)３次，得出平均值為０．５２％．靈芝牛蒡茉莉花茶飲料最優(yōu)調(diào)配方案為 Ａ３Ｂ１Ｃ１Ｄ２，即調(diào)配液２５％，茉莉花茶１５％，檸檬酸 ０．０７％，白砂糖糖７％．由極差分析得出各因素對保健茶飲料感官評價的影響：茉莉花茶＞白砂糖＞檸檬酸 ＞調(diào)配液．按最優(yōu)方案調(diào)配的茶飲料經(jīng)均質(zhì)、灌裝、封口、滅菌、冷卻得產(chǎn)品，呈淡黃綠色，均勻一致，有靈芝和 茉莉花茶的香氣和滋味，口感好．

３ 結(jié)論

１）通過單因素實驗得出靈芝發(fā)酵培養(yǎng)最佳條件為溫度２７ ℃、時間６ｄ、轉(zhuǎn)速１１０ｒ／ｍｉｎ．
２）通過正交試驗優(yōu)化保健茶飲料產(chǎn)品穩(wěn)定性條件為羥甲基纖維素鈉０．０９％、黃原膠０．０５％、β－環(huán)狀糊精０．２０％．
３）通過正交試驗優(yōu)化保健茶飲產(chǎn)品料調(diào)配條件為調(diào)配液２５％、茉莉花茶１５％、檸檬酸０．０７％、白砂糖 ７％，經(jīng)均質(zhì)、灌裝、封口、滅菌得飲料產(chǎn)品． 靈芝牛蒡茉莉花茶飲料產(chǎn)品澄清透明，呈淺黃綠色，既有茉莉花茶香氣和滋味，又有靈芝和牛蒡獨特風(fēng) 味，口味純正，酸甜適宜，營養(yǎng)功效全面，衛(wèi)生檢驗符合國家標(biāo)準(zhǔn)．

 

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