黃芪(Astragalus membranaceus)，又名綿芪，為豆 科（Leguminosae）黃芪屬（Astragalus）多年生草本植物，主要產(chǎn)于內(nèi)蒙古、甘肅、黑龍江和山西等地。黃 芪多糖是黃芪藥用部分的主要活性物質(zhì)之一，可作 為免疫促進(jìn)劑或調(diào)節(jié)劑，同時(shí)具有抗衰老、抗氧化、 抗炎、抗腫瘤及提高免疫力等多重功效。

1 材料和方法 

1.1 試驗(yàn)材料 

黃芪購于黑龍江省大慶市讓胡路區(qū)普濟(jì)康復(fù)醫(yī) 院藥房。 黃芪烘干→粉碎→過 80 目篩（直徑 0.180 mm）→粉末→真空干燥器備用。 

1.2 主要試劑 

無水乙醇、葡萄糖、苯酚、濃硫酸、碳酸鈉、濃氨水、過 氧化氫、丙酮、溴化鉀、硫酸亞鐵、氫氧化鉀、水楊酸、三（羥 甲基）氨基甲烷、鄰苯三酚，所有試劑均為市售分析純。 

1.3 試驗(yàn)儀器 

試驗(yàn)所需儀器如表 1 所示。

1.4 試驗(yàn)方法 

1.4.1 堿溶多糖提取流程 

黃芪粉末→優(yōu)化 1%氫 氧化鉀溶液提取的條件（提取溫度、提取時(shí)間、料液 比）→離心 （3 600 r·min-1 ，15 min）→合并上清液→ 100 ℃水浴濃縮至原體積 1/3→硫酸中和→透析→ 水浴濃縮→3 倍體積 95%乙醇醇沉過夜→無水乙 醇、丙酮離心洗滌（3 600 r·min-1 ，15 min）→干燥器 干燥→堿溶粗多糖→冷凍保存。 

1.4.2 堿溶多糖紅外光譜檢測 

分析天平稱取黃芪 堿溶多糖 2.0 mg，加入溴化鉀壓片后經(jīng)傅立葉變換 紅外光譜儀在 4 000~500 cm-1 波數(shù)范圍內(nèi)掃描。 

1.4.3 堿溶多糖含量測定方法 

采用苯酚硫酸法， 用分光光度計(jì)在 490 nm 波長處測定其吸光度，用回歸 方程計(jì)算出堿溶多糖含量，并計(jì)算其堿溶多糖得率。 （1）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精確稱量干燥至恒 質(zhì)量的無水葡萄糖于容量瓶中，定容。分別量取葡萄 糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成一定濃度梯度于干燥試管中，補(bǔ)加 蒸餾水至相同體積，蒸餾水為空白，分別加 6%苯酚 0.5 mL，濃 H2SO4 2.5 mL，立即搖勻，室溫靜置 10 min 后于 490 nm 測定光吸收值，每個(gè)濃度平行做 3 次， 繪制葡萄糖濃度與吸收值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （2）多糖含量測定。以堿溶多糖取代葡萄糖標(biāo)準(zhǔn) 溶液進(jìn)行（1）試驗(yàn)，測定 490 nm 吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲 線計(jì)算多糖含量，進(jìn)一步獲得多糖得率，其計(jì)算公式 為：多糖得率(%)=多糖含量/原料質(zhì)量×100 1.4.4 堿溶多糖提取工藝條件優(yōu)化（1）堿溶多 糖提取單因素試驗(yàn)。以 1%氫氧化鉀為溶劑，在其他條件相同的情況下，分別研究提取溫度、提取時(shí)間、 料液比 3 個(gè)因素對黃芪多糖提取率的影響。各因素 梯度設(shè)置詳見表 2。

（2）多糖提取的正交試驗(yàn)。在上述單因素試驗(yàn)的 基礎(chǔ)上，按 L934 設(shè)計(jì)正交表進(jìn)行三因素三水平的正 交試驗(yàn)，得出最佳提取條件。

2 結(jié)果與分析

在 3 438.24 cm-1 和 3 425.00 cm-1 處有締合的-OH 伸縮振動(dòng)吸收峰，具有典型的-OH 吸收峰；在 1 900 cm-1 ~1 600 cm-1 ，具有羰基吸收 峰，證明是多糖。在提取溫度為 60 ℃、料液比為 1∶15 的條件下，研究提取時(shí)間對黃芪堿溶多糖提取率的 影響。在 50～130 min，多糖的提取率隨 提取時(shí)間的增加呈先升后降趨勢，堿溶多糖提取率 在 110 min 達(dá)到峰值，為 6.9%，與其他提取時(shí)間處理 差異顯著（P＜0.05）。因此，提取時(shí)間選擇 110 min 較 為適宜。在 50～90 ℃，隨溫度的升高， 提取率呈先升后降的趨勢，在 60 ℃達(dá)到峰值，提取 率為 7.7%，與其他溫度處理差異顯著（P＜0.05）。因 此，黃芪堿溶多糖的提取溫度選擇 60 ℃較為適宜。

3 結(jié)論與討論

采用不同的提取方法提取黃芪多糖，結(jié)果表明：提取方法 不同黃芪多糖提取率不同，但提取率均未超過 10%。梁子敬等、李海歐等分別采用超聲輔助提 取法和水回流提取法提取黃芪多糖，結(jié)果表明：黃芪 多糖提取率分別為 6.18%和 6.4%，兩者的提取率均 不高，但這兩種方法在提取過程中對黃芪有效成分 破壞程度小。李金芳采用水煎煮法確定的最佳提 取工藝為：提取時(shí)間 45 min、提取溫度 100 ℃、料液 比 1∶10、提取次數(shù) 3 次, 多糖提取率為 10.35%。劉永 錄等采用 NaOH 水溶液提取法：取黃芪藥材 400 g， 分別加 12 和 10 倍量 pH 值為 12 的 NaOH 水溶液 煎煮 2 次，經(jīng)后續(xù)處理，黃芪多糖提取率為 7.73%。 本試驗(yàn)采用堿提法通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對黃 芪堿溶多糖的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，在提取溫度 70 ℃、 提取時(shí)間 130 min、料液比 1∶20，堿溶多糖提取率達(dá) （15.63±0.36）%，上海博迅醫(yī)療提高了黃芪的利用率及黃芪多糖的 提取率。

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