辣椒花藥的培養(yǎng)！
來(lái)源：未知
發(fā)布日期：2019-06-10 11:20【大 中 小】
由于夏季高溫多雨，各種菌類大量滋生，雖然此時(shí)的辣椒花藥最適宜誘導(dǎo)胚狀體產(chǎn)生，但過(guò)高的污染率導(dǎo)致了花藥培養(yǎng)效率變低。常規(guī)辣椒花藥接種方法是在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，用尖頭鑷子挑開(kāi)滅菌后的花蕾，夾取花藥接種至培養(yǎng)基中。辣椒花藥較小，鑷子夾取花藥易夾傷或夾死花藥，且該方法耗時(shí)長(zhǎng)，所需人工成本高。另外，基因型特異性強(qiáng)也是限制花藥培養(yǎng)技術(shù)在辣椒遺傳改良中廣泛應(yīng)用的因素。本研究通過(guò)改進(jìn)花蕾滅菌和花藥接種方式，以及往培養(yǎng)基中添加抑菌劑，簡(jiǎn)化了花藥培養(yǎng)技術(shù)流程，既能提高花藥培養(yǎng)操作效率，又有效降低了花藥染菌率；同時(shí)，采用該方法比較23個(gè)辣椒品種進(jìn)行的花藥培養(yǎng)效果，篩選出高再生頻率的辣椒品種，以期為提高辣椒花藥培養(yǎng)效率，加快辣椒花藥培養(yǎng)技術(shù)的實(shí)用化奠定基礎(chǔ)。
目前，大多辣椒花藥培養(yǎng)文獻(xiàn)報(bào)道均采用花蕾直接滅菌，由于花萼與花瓣間隙中的細(xì)菌難以徹底殺死，接種后花藥染菌率仍然居高不下。本試驗(yàn)剝?nèi)セɡ?/4的萼片再進(jìn)行滅菌，花藥染菌率降低至5%以下，說(shuō)明該方法更易殺死花蕾表面細(xì)菌和內(nèi)生菌，具有可行性。常規(guī)的花藥培養(yǎng)基需要高壓滅菌，接種需要在超凈工作臺(tái)中用鑷子夾取花藥轉(zhuǎn)至培養(yǎng)基表面。該方法需要特定的試驗(yàn)環(huán)境，且由于辣椒花藥小，接種花藥費(fèi)時(shí)費(fèi)工，難以進(jìn)行規(guī)?；?/span>產(chǎn)。其他植物進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，研究者們提出了一種新的組織培養(yǎng)方法，即通過(guò)往培養(yǎng)基中添加抑菌劑，使植物組織培養(yǎng)脫離嚴(yán)格無(wú)菌的操作環(huán)境進(jìn)行組織培養(yǎng)的一種方法，稱之為開(kāi)放式組織培養(yǎng)。
目前，已廣泛應(yīng)用于葡萄、香蕉、煙草等植物的組織培養(yǎng)中。在開(kāi)放組織培養(yǎng)過(guò)程中，添加了抑菌劑的培養(yǎng)基不需要在高溫高壓下進(jìn)行滅菌，接種外植體也不需要在超潔凈的工作臺(tái)上進(jìn)行；因此，該方法從根本上簡(jiǎn)化了組織培養(yǎng)環(huán)節(jié)，降低了成本。本研究中，選擇氨芐青霉素和兩性霉素B作為抑菌劑，用于在開(kāi)放條件下博辣紅?；ㄋ幣囵B(yǎng)。結(jié)果顯示，25mg/L的氨芐青霉素和25mg/L的兩性霉素B適宜用于辣椒花藥培養(yǎng)，花藥染菌率1.42%，死亡率為3.89%，愈傷組織誘導(dǎo)率為13.51%，胚狀體誘導(dǎo)率為3.87%，由此說(shuō)明，25mg/L的氨芐青霉素和25mg/L的兩性霉素B適宜于用做開(kāi)放式培養(yǎng)抑菌劑。
此外，還改進(jìn)了花藥接種方式，試驗(yàn)結(jié)果表明：徒手?jǐn)D壓花藥可降低對(duì)花藥的傷害，花藥接種速度與傳統(tǒng)方法相比可提高2.18倍，說(shuō)明徒手?jǐn)D壓花藥省時(shí)、省工，可有效降低人工成本。作物花藥胚狀體誘導(dǎo)率與基因型密切相關(guān)。辣椒花藥培養(yǎng)受基因型、生長(zhǎng)環(huán)境、植株?duì)顟B(tài)、培養(yǎng)基成分等多種因素的影響，基因型是影響辣椒花藥培養(yǎng)的重要因素之一。本研究也表明不同基因型間花藥胚狀體誘導(dǎo)率存在差異，且從23個(gè)基因型品種中篩選到了3個(gè)高誘導(dǎo)頻率的辣椒品種，其胚狀體誘導(dǎo)率大于5%，可滿足種質(zhì)創(chuàng)新條件。
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