高壓蒸汽滅菌技術(shù)廣泛應(yīng)用于各類實驗室，特別是獸醫(yī)實驗室，操作微生物較多，高壓滅菌器幾乎成了必備設(shè)備。基于高溫水蒸氣具有較強(qiáng)的穿透作用，可以有效的殺滅各種微生物和芽孢，高壓滅菌器可以用于各種微生物的消毒滅菌，不僅可以用于實驗室污染廢棄物的消毒，也可以用于實驗室器械、培養(yǎng)基等清潔物的滅菌。

1 高壓滅菌器規(guī)范

根據(jù)《中華人民共和國特種設(shè)備安全法》等相關(guān)法律要求，高壓滅菌器屬于特種設(shè)備安全管理范疇，采購前要查驗生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品質(zhì)量證明書，其中應(yīng)包含產(chǎn)品安全性能監(jiān)督檢驗書、產(chǎn)品合格證和廠家特種設(shè)備制造許可證，安裝時要到當(dāng)?shù)?/span>市場監(jiān)督管理部門（質(zhì)量監(jiān)督部門）進(jìn)行告知備案，取得特種設(shè)備使用登記證后方可使用。高壓滅菌器每 3 年要請有資質(zhì)的特種設(shè)備檢驗單位進(jìn)行一次檢驗，配件壓力表每半年檢定一次，安全閥每年校驗一次。相關(guān)人員持證上崗，使用單位必須有一名人員取得特種設(shè)備安全管理證，操作人員必須取得特種設(shè)備壓力容器操作證。

2 高壓滅菌器使用

注意安全是第一位的，小心蒸汽燙傷，有的操作者滅菌結(jié)束時為了加快排氣，將安全閥提起，這種做法是不允許的，高溫蒸汽容易傷害到人員，另外安全閥一經(jīng)彈開，彈簧結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，需要重新校驗。滅菌結(jié)束后，打開蓋子時，雖然相對壓力已經(jīng)降到零，但是水和蒸氣仍然可以達(dá)到 100°C左右，操作者應(yīng)該帶上手套等護(hù)具，做好人員防護(hù)。要做好用電安全，高壓滅菌器一般電功率較大，多臺滅菌器同時使用要計算好功率，配備適合電纜，不能超載使用，電源必須有效接地，定期測試斷路器，檢查電源線是否被水蒸氣腐蝕等。使用高壓滅菌器要做到污染物、清潔物分開，實驗室不能使用同一個滅菌器進(jìn)行污物與清潔物的滅菌。必須按照說明書加入合適量的水，應(yīng)當(dāng)使用軟化水或蒸餾水防止結(jié)垢，滅菌物品容積不超過滅菌器的 3/4，特別注意不能有物品阻擋排氣孔。潔凈物高壓滅菌時，要注意防止濕包現(xiàn)象的產(chǎn)生，濕包即是滅菌后出現(xiàn)了器械等包裝被濕潤的情況，細(xì)菌等病原微生物可以通過濕潤的部分污染到潔凈物品上，導(dǎo)致滅菌失敗，引起實驗污染或手術(shù)感染。解決濕包的方法是，合理規(guī)范的進(jìn)行包裝，提高蒸汽的質(zhì)量，減少含水量，使用真空脈動滅菌器。

3 真空高壓滅菌器

有的實驗室使用的是大型脈動雙扉高壓蒸汽滅菌器，扉即是門，雙扉保障了滅菌物品的路徑，是從一側(cè)的門進(jìn)入，從另一側(cè)的門取出，達(dá)到生物安全效果，脈動是指滅菌器有幾次抽真空的動作，除去冷氣團(tuán)，達(dá)到更好的滅菌效果。抽真空方式不能用于培養(yǎng)等液體的滅菌。生物安全等級較高的實驗室應(yīng)考慮采用帶有冷凝水收集的高壓滅菌器，此類滅菌器可以對冷凝水進(jìn)行收集和滅菌，保障生物安全。

4 高壓滅菌消毒效果驗證

國標(biāo)《實驗室生物安全通用要求》中規(guī)定，實驗室要對消毒滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測，另外消毒效果驗證也是保證實驗結(jié)果的重要措施。高壓滅菌器日常使用時，需要放置滅菌指示卡或指示膠帶，滅菌結(jié)束后指示卡或膠帶變為指定的顏色，即表示滅菌合格。B- D 測試廣泛用于抽真空滅菌器性能的測試（B 和 D 是兩位發(fā)明者的姓氏字母），有商品化的檢測包，將B- D 測試包單獨放置于滅菌器的中央，使用 134°C，3.5min抽真空條件滅菌（具體參照說明書），滅菌后指示卡呈現(xiàn)規(guī)定交叉圖案，說明真空滅菌效果合格。另外可以使用微生物培養(yǎng)的方法進(jìn)行滅菌器效果驗證，將菌片（枯草芽孢桿菌等）用多層紗布包裹，滅菌后將菌片投入特定培養(yǎng)基后觀察，培養(yǎng)基指示劑變色說明仍然有細(xì)菌生長，滅菌失敗，培養(yǎng)基澄清
未變色，說明沒有細(xì)菌生長，滅菌效果合格。