近年來，隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，使耐藥細菌不斷增 加，其耐藥性也隨之增強，導(dǎo)致感染性疾病例數(shù)增多，嚴(yán)重 威脅到人類的生命健康，許多天然藥物具有抗病、低毒、不 易產(chǎn)生耐藥性等特點與優(yōu)勢，開展中藥抗菌的應(yīng)用和研究， 對于細菌性疾病的防治具有重要意義。婦科洗是我院根據(jù) 臨床驗方研制的中藥制劑，主要由苦參、苦樹皮、千里光、 銀花藤、魚腥草、野菊花、關(guān)黃柏、蛇床子等中藥組成。有 抗菌、消炎的作用，具較好的臨床療效。本實驗通過測定婦 科洗對金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus）、 大 腸 埃 希 菌（ Escherichia col，E.coli）、 白 色 念 珠 菌（ Candida albicans，C.albicans）的 MIC 和 MBC，分析婦科 洗對不同菌株的最低抑菌濃度，進行抑菌效果評價，研究中 藥方劑對常見的陰道炎致病菌的體外抑菌活性，為臨床應(yīng)用 提供科學(xué)依據(jù)。

標(biāo)準(zhǔn)菌：金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、 大腸埃希菌（ATCC25922）、白色念珠菌，由廣西柳州市中 醫(yī)醫(yī)院微生物室分離鑒定。

婦科洗制劑（柳州市中醫(yī)醫(yī)院制劑室，批準(zhǔn) 文號：桂藥制字 Z02060095，批號：20160811）；氯化三苯四氮唑（triphenyltetrazoliumchloride，TTC，中國華東師范大 學(xué)化工廠，批號：20101026）；無水乙醇（成都市科龍化工試 劑廠，批號：2016042801）；氯化鈉注射液（浙江國鏡藥業(yè)有 限公司，批號 :C116080303）；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（廣東 環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3104864）；沙氏葡萄糖液體 培養(yǎng)基（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3104833）；營 養(yǎng)瓊脂（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3103446）；營 養(yǎng)肉湯（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號 ：3103278）。

DH64 型電熱恒溫干燥箱（上海市躍進醫(yī)療器械一廠），DNP-9162BS-III 型電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海市新苗醫(yī)療器械有限公司），MJX-100B-2 型霉菌培養(yǎng)箱（上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠），JA5003N 電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

取婦科洗 1 瓶（344 mg/mL），文火濃縮 至 86 mL，此時得到藥液濃度為 1000 mg/mL，對藥液進行 滅菌備用。在無菌條件下，將婦科洗藥液用孔徑 0.22 um 無 菌濾頭過濾除菌，用生理鹽水按照倍比稀釋法將藥液稀釋成 1000 mg/mL、500 mg/mL、250 mg/mL、125 mg/mL、 62.5 mg/mL、31.25 mg/mL、15.625 mg/mL、7.813 mg/ mL、3.906 mg/mL、1.953 mg/mL 的濃度梯度。

用接種環(huán)分別取金黃色葡萄球菌、大 腸埃希菌、白色念珠菌菌落，用 0.9% 的生理鹽水校正濃度至 0.5 麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)，再用營養(yǎng)肉湯（金葡菌、大腸菌）或沙氏 葡萄糖液體培養(yǎng)基（白念）以 1:100 倍數(shù)稀釋備用（含菌量約 106CFU· mL-1）。

參考美國臨床試驗室標(biāo)準(zhǔn)委員會 （CLSI）所公布的標(biāo)準(zhǔn) （CLSI，2007），采用微量稀釋法 測定各樣品對不同菌株的 MIC 值。用微量加樣器分別取各個 濃度的藥液 50μl，依次由低到高濃度加到 96 孔板中并做好 標(biāo)記。再取 50μl 的各個菌液加入到 96 孔板中，使每孔接種 菌量約 5×105CFU·mL-1 個菌。同時每個實驗菌組設(shè)無菌對 照組和無藥對照組。無菌對照孔內(nèi)加 100 μl 營養(yǎng)肉湯，其中 白色念珠菌組加沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基；無藥對照孔內(nèi)只加 50 μl 營養(yǎng)肉湯和 50 μl 菌液。將 96 孔板振蕩 1 分鐘，使孔 內(nèi)菌液與藥液混勻后用封口膠密封好，置于 35℃的恒溫培養(yǎng) 箱孵育（白色念珠菌組于 25℃恒溫培養(yǎng)箱孵育）。24 小時后， 每孔加入 1% 氯化三苯四氮唑（TTC）5 μl，在恒溫箱內(nèi)孵 育 3 小時后取出觀察各孔顏色變化，有細菌生長孔顯紅色， 不顯紅色的最低藥物濃度為最低抑菌濃度（MIC）。觀察藥 物 MIC 以上未見細菌生長的各孔，用移液槍移取 50 μl 至不 含藥物的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿中，白色念珠菌移種至沙氏葡萄糖 瓊脂培養(yǎng)皿，分別置于 35℃和 25℃的培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。24 小 時后觀察培養(yǎng)皿上有無細菌生長，計數(shù)少于 5 個菌落的為該 藥的最低殺菌濃度（MBC）。

本實驗結(jié)果表明，婦科洗藥液對白色念珠菌表現(xiàn)出較 好的抗菌活性，婦科洗從藥性理論上來看，組方藥材性味苦 寒，歸膀胱經(jīng)，與腎相表里，功效抗菌、消炎。用于婦科各 種炎癥，即婦科洗的藥效作用部位在陰道，陰道炎常見致病 菌為白色念珠菌，抑菌試驗結(jié)果與臨床辨證歸經(jīng)理論相一 致。與西藥或抗菌藥物相比，中藥可辨證論治，療效穩(wěn)定且 較好、副作用極少，患者易接受?；謴?fù)正常的陰道微生物生 態(tài)環(huán)境是治愈陰道病的根本，中藥對陰道炎的治療恰好從這 個目的出發(fā)。 本實驗采用三種常見的菌株進行實驗，菌株存在局限性， 對細菌、真菌的抑制作用不全面，另婦科洗藥液為中藥組方， 下一步將對抑菌活性成分進行分離純化，明確抑菌的物質(zhì)基 礎(chǔ)，擴大中藥的臨床藥效價值，對開發(fā)民間中藥資源的臨床 應(yīng)用提供參考。 陰道炎是困擾女性身體健康的主要疾病之一，屬祖國醫(yī) 學(xué)“陰癢”、“帶下病”的范疇。臨床西藥治療以抗菌藥物、 抗真菌治療為主，隨著細菌、真菌耐藥情況越來越嚴(yán)峻，臨 床可選擇的抗菌藥物越來越少，而且存在用藥周期長、肝功 能損害、復(fù)發(fā)率高等弊端。抗菌中草藥的研究，尤其是清熱 燥濕中藥已成為近年來該領(lǐng)域的研究熱點。我院婦科洗不僅 對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌具有良好的抑 菌效果，對皮膚溫和、無毒無刺激，且具有一定的消炎、鎮(zhèn) 痛作用，適用于婦科疾病預(yù)防及治療，具有良好的市場應(yīng)用 和開發(fā)價值。



 

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