牛傳染性鼻氣管炎( IBR) ,又稱(chēng)壞死性鼻炎、紅 鼻病,是由牛傳染性鼻氣管炎病毒( IBRV) 引起牛 的一種急性、熱性、接觸性傳染病,是 OIE 規(guī)定的 B 類(lèi)動(dòng)物疫病,我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部( 原農(nóng)業(yè)部) 將其定 為二類(lèi)動(dòng)物疫病。
1 材料與方法
1. 1 血清樣品
從西藏拉薩市、林芝市、日喀則市、昌都市、山南 市、那曲市和阿里地區(qū)等七個(gè)地區(qū)共采集未接種 IBR 疫苗的牦牛血清 300 份,其中拉薩市 30 份,其余 6 個(gè) 地區(qū)各 45 份。血清采回后-20 ℃ 保存,檢測(cè)前置于 室溫下自然解凍。
1. 2 主要儀器與試劑
酶標(biāo)分析儀( 型號(hào)為 Rayto RT-6100) ,購(gòu)自深圳 雷杜生命科學(xué)股份有限公司; 微量移液器( 型號(hào)為 dragon-lab) ,購(gòu)自賽伯樂(lè)( 上海) 儀器有限公司; 優(yōu)普 超純水制造系統(tǒng),購(gòu)自成都超純科技有限公司; 恒溫恒濕培養(yǎng)箱,購(gòu)自上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠(chǎng); 冰箱,購(gòu)自中科美菱低溫科技股份有限公司。 IBR 抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒、牛傳染性鼻氣管 炎抗原酶聯(lián)免疫分析試劑盒,均購(gòu)自江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司。
1. 3 IBR 血清抗體、抗原的檢測(cè)
IBR 血 清 抗 體、抗原檢測(cè)嚴(yán)格按照酶聯(lián)免疫 ( ELISA) 分析試劑盒說(shuō)明書(shū)方法操作。 結(jié)果判定: 陽(yáng)性對(duì)照孔 OD450平均值≥1. 00,陰性 對(duì)照孔 OD450平均值≤0. 10 時(shí),判定試驗(yàn)成立; 陰性 對(duì)照孔平均值+0. 15 為臨界值; 樣品 OD450值<臨界值 時(shí),判定 為 陰 性; 樣 品 OD450 值 ≥ 臨界值時(shí)判定為 陽(yáng)性。
1. 4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析
采用 SPSS 19. 0 軟件對(duì)西藏各地區(qū)牦牛 IBR 血 清抗體陽(yáng)性率進(jìn)行顯著性分析,P>0. 05 差異不顯著, P<0. 05 差異顯著。
2 結(jié)果與分析
西藏七個(gè)地區(qū)牦牛血清樣品中 IBR 抗體、抗原 檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表 1。
從表 1 可見(jiàn): 血清抗體平均陽(yáng)性率為 11. 00% ( 33 /300) ,其中日喀則市和林芝市牦牛 IBR 血清抗 體陽(yáng)性率最高,均為 17. 78%( 8 /45) ; 山南市最低,為 0( 0 /45) ; 血清抗原平均陽(yáng)性率為 10. 00%( 30 /300) , 其中日喀則市牦牛 IBR 血清抗原陽(yáng)性率最高,為 20. 00%( 9 /45) ; 山南市最低,為 2. 22% ( 1 /45) 。對(duì) 七個(gè)地區(qū)牦牛血清樣品 IBR 抗體、抗原陽(yáng)性率進(jìn)行 顯著性分析,結(jié)果表明,日喀則市和林芝市牦牛 IBR 血清抗體陽(yáng)性率與昌都市、山南市差異顯著 ( P < 0. 05) ; 拉薩市牦牛 IBR 血清抗體陽(yáng)性率與山南市差 異顯著( P<0. 05) 。日喀則市牦牛 IBR 血清抗原陽(yáng)性 率與阿里地區(qū)、昌都市和山南市差異顯著( P<0. 05) , 拉薩市牦牛 IBR 血清抗原陽(yáng)性率與山南市差異顯著 ( P<0. 05) 。
3 討論
自 1980 年周泰沖等首次從新西蘭進(jìn)口至我 國(guó)的奶牛中分離到 IBRV 以來(lái),我國(guó)各地均出現(xiàn)了 IBR 流行的報(bào)道,且部分地區(qū)流行情況較為嚴(yán)重, 而與西藏相鄰的新疆、青海、四川等省區(qū) IBR 流行情 況也 令 人 堪 憂(yōu)。胡 文 兵 等、李靜 等、劉潔 瓊 等分別于 2010 年、2012 年和 2016 年對(duì)新疆不同地區(qū)牛群的 IBR 感染情況進(jìn)行調(diào)查,結(jié)果表明,抗體 陽(yáng)性率分別為 36. 9%、82. 5%、80. 7%; 賀曉龍等、 沈艷麗等、韓照清等分別于 2009 年、2010 年和 2012 年對(duì)青海不同地區(qū)進(jìn)行 IBR 流行情況調(diào)查,結(jié) 果表明,血清抗體陽(yáng)性率分別為 47. 62%、19. 8% 和 44. 6%; 韓照清等、何美琳等于 2012 年、鄧宇 等于 2015 年在四川部分地區(qū)開(kāi)展 IBR 流行情況 調(diào)查,結(jié) 果 表 明,血清抗體陽(yáng)性率分別為 27. 9%、 77. 4%、35. 29%; 韓照清等2014 年在我國(guó)西部高 原地區(qū)的調(diào)查結(jié)果表明,西藏部分地區(qū) IBR 血清陽(yáng) 性率為 38. 6%、青海部分地區(qū)為 44. 6%、四川部分地 區(qū)為 27. 9%; 曲萍等對(duì)包括四川、青海、新疆等在 內(nèi)的 11 個(gè)半農(nóng)半牧區(qū)的 IBR 血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明, 2014—2016 年的血清陽(yáng)性率分別為 51. 46%、 57. 16%和 50. 16%; 同時(shí)有資料顯示,與西藏相鄰的 印度阿魯納恰爾邦牦牛 IBR 血清抗體陽(yáng)性率也高達(dá) 41%,而本次牦牛 IBR 血清抗體檢測(cè)結(jié)果明顯低 于西藏周邊各省份及地區(qū)。