《中國(guó)藥典》2015 年版記錄并收載 5 個(gè)品種的 海馬藥材：三斑海馬 Hippocampus trimaculatus Leach、線紋海馬 Hippocampus kelloggi Jorden et Snyder、大海馬 Hippocampus kuda Bleeker、刺海馬 Hippocampus histrix Kaup 和小海馬（海蛆） Hippocampus japonicus Kaup 的干燥體，有散結(jié)消 腫、溫腎壯陽(yáng)等功效。三斑海馬（俗名龍落子）， 隸屬我國(guó)國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，通常棲息在 1～100 公尺左右的具海藻床的礁石區(qū)中，也可生長(zhǎng)在河海 交界處，喜食活餌，糠蝦、毛蝦、磷蝦、螢蝦等小 型浮游甲殼動(dòng)物是其主要食物來(lái)源，其體色艷麗， 無(wú)毒，具有良好的觀賞價(jià)值。

1 材料與儀器 

1.1 材料 

共收集海馬藥材樣品 13 份，分別購(gòu)自 浙江磐安以及安徽亳州藥材市場(chǎng)，包括三斑海馬樣 品 12 份，寶珈海龍樣品 1 份，經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué) 第一臨床醫(yī)學(xué)院葛宇清副研究員鑒定為三斑海馬 Hippocampus trimaculatus Leach 和寶珈海龍 Doryichthys boaja Bleeker。將所用樣品做好標(biāo)記， 于干燥封口袋中避光保存，樣品保存于浙江中醫(yī)藥 大學(xué)藥學(xué)院。同時(shí)在 GenBank 數(shù)據(jù)庫(kù)中下載 20 條 COI、16 S 和 ATP6 序列（線紋海馬 H. kelloggi Jorden et Snyder 3 條，大海馬 H. kuda Bleeker 2 條，小海 馬 H. mohnikei Bleeker 3 條，刺海馬 H. histrix Kaup 2 條，太平洋海馬 H. ingens Girard 2 條，直立海馬 H. erectus Perry 2 條，虎尾海馬 H. comes Cantor 2 條，棘海馬 H. spinosissimus Weber 3 條，擬海龍 Syngnathoides biaculeatus Bloch 1 條）。 

1.2 試劑 

無(wú)水乙醇（上海凌峰化學(xué)試劑有限公司）；海 洋動(dòng)物組織基因組 DNA 提取試劑盒（天根生化 科技有限公司）；瓊脂糖粉（BIOWEST）；50×TAE 緩沖液[生工生物工程（上海）股份有限公司]； DL2000 DNA Marker（TaRaKa 公司）；6×Loading Buffer（TaRaKa 公司，）；4S Green 染料（BBI Life Sciences）；10×PCR buffer（TaRaKa 公司）；dNTP Mix（TaRaKa 公司）；rTaq 酶（TaRaKa 公司）； COI、16 S rRNA 和 ATP 引物由上海桑尼生物科 技有限公司合成。

1.3 主要儀器設(shè)備 

電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公 司]；電熱恒溫水槽（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）； 超微量分光光度計(jì)（美國(guó) Thermo 公司）；鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；微波爐 （格蘭仕微波生活電器有限公司）；S1000TM Thermal Cycler（美國(guó) Bio-rad 公司）；凝膠電泳儀（美國(guó) Bio-rad 公司）；凝膠成像系統(tǒng)（美國(guó) Bio-rad 公司）； 離心機(jī)（杭州寶誠(chéng)生物技術(shù)有限公司）。